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新聞中心

李斯特氏菌顯色培養基操作步驟

發布時間:2018-03-13瀏覽次數:1980返回列表

    上海樊克生物科技有限公司,由具有行業背景和豐富市場經驗的專業人士組成,致力于為生命科學研究領域提供優質產品,為廣大科研工作者提供優質服務。既能滿足研發類客戶對產品種類、包裝、純度的特殊要求,也能滿足生產型企業從小試、中試到規模化生產各個階段的綜合需求

    產品名稱:李斯特氏菌顯色培養基

    規格:BR10ml

    包裝:20支/盒

    用途:用于李斯特氏菌的顯色培養,單增李斯特氏菌顯藍色,外圍有一不透明環

    溫馨提示:僅供科研實驗,不得用于其它用途!歡迎來電咨詢。

    配方:(g/L)

    營養物質 70.0

    顯色劑 1.0

    pH 7.2 ± 0.2 25 ℃

    李斯特氏菌添加劑 6.0g

    此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得佳的結果。




    稱取基礎培養基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動,使其乳化均勻,將二者分別于 121 ℃高壓滅菌 15 min 。冷至 50 ℃左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑 1 和 2 各 1 支,混勻,傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 5mm ,這樣有利觀察不透明環。

    貯存:制備好的固體平板保存于 2-8 ℃,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃

    失效:干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

    操作步驟:

    使用前,把制備好的培養基放置室溫 10-20 分鐘。

    1 、按 SN 標準、 GB 標準、 FDA 標準、 ISO 標準或其它標準制備樣品液;

    2 、把 25g 樣品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培養 48 小時;或把樣品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 : 10 的比例混勻, 30 ℃培養 24 小時。

    3 、取一環增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養基上, 37 ℃培養 24-48 小時。

    質量控制:

    1 、外觀:此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養基。

    2 、微生物試驗:在 37 ℃培養 24-48 小時

    典型特征:

    單增李斯特氏菌 37 ℃培養 24-28 小時, 平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。綿羊李斯特氏菌 37 ℃培養 48 小時 ,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。西爾李斯特氏菌 37 ℃培養 24-48 小時, 平板上出現藍色菌落,菌落周圍沒有不透明環。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。

    培養基pH 的初步調整:

    培養基各成分完全溶解后,應進行pH 的初步調正,因培養基在加熱消毒過程中、pH 會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH 卻會有顯著的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的終pH ,保證培養基的質量。pH 調正后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。

    培養基的分類:

    (1)合成培養基。合成培養基的各種成分完全是已知的各種化學物質。這種培養基的化學成分清楚,組成成分,重復性強,但價格較貴,而且微生物在這類培養基中生長較慢。如高氏一號合成培養基、察氏(Czapek)培養基等。

    (2)天然培養基。由天然物質制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養霉菌,后者用于培養細菌。這類培養基的化學成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養豐富,所以常被采用。

    (3)半合成培養基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養基的基礎上添加某些天然成分,如培養霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基。這類培養基能更有效地滿足微生物對營養物質的需要。

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