液相操作中，有一些小細(xì)節(jié)上的誤操作在精益求精的實(shí)驗(yàn)室人看來是要盡可能避免的，細(xì)節(jié)雖小，影響很大。古朵生物這就帶各位小伙伴們看一看，這些錯(cuò)誤你們有犯過嗎？犯過不怕，記得改正哦~

加入有機(jī)相之后再測(cè)量流動(dòng)相的PH值

作為液相色譜的基礎(chǔ)，流動(dòng)相的各項(xiàng)參數(shù)是保障實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的重中之重，特別是PH值。通常情況下對(duì)流動(dòng)相PH值的測(cè)量是測(cè)量水相中的PH值參數(shù)，而在加入有機(jī)相后PH測(cè)量的PH值是會(huì)產(chǎn)生誤差的。因?yàn)槊恳淮渭尤氲挠袡C(jī)相并不能保證完全的同質(zhì)同量，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度。

測(cè)量流動(dòng)相的PH值，是測(cè)量水相中的PH值參數(shù)。有機(jī)相加入之后PH值參數(shù)的測(cè)量就和之前有誤差。

緩沖鹽使用不當(dāng)

在流動(dòng)相中，加入緩沖鹽可以控制和修正流動(dòng)相中的PH值變化。樣品的機(jī)制，空氣中的CO2等氣體以及水中的雜質(zhì)都能夠造成流動(dòng)相PH值變化進(jìn)而影響樣品的保留、峰形、峰面積參數(shù)。而每一種緩沖鹽都只能在一定的PH值范圍內(nèi)提供了佳的pH穩(wěn)定性。而在這個(gè)范圍外，該緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。所以需要在流動(dòng)相中加入合適的緩沖鹽，要么在正確的范圍內(nèi)使用緩沖鹽，要么選擇一個(gè)能夠完全覆蓋所需pH值的緩沖鹽。

后，緩沖鹽的添加也是具有一定的要求的，如果將水相的緩沖溶液加入到有機(jī)相中，會(huì)大大增加緩沖鹽析出的風(fēng)險(xiǎn)。緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯，但會(huì)對(duì)儀器的各個(gè)部件都會(huì)產(chǎn)生一定影響。長(zhǎng)此以往不僅會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，會(huì)有可能導(dǎo)致儀器損傷甚至損壞。

直接用純有機(jī)溶劑沖系統(tǒng)

如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液，而這次沒有經(jīng)過調(diào)查就直接在B通道使用了純的有機(jī)溶劑，那么就會(huì)造成該通道緩沖鹽析出、出現(xiàn)堵塞等風(fēng)險(xiǎn)。

僅使用超聲來給流動(dòng)相脫氣

超聲脫氣有一定的脫氣作用，但完全脫氣的效果并不理想。

所以在此建議使用真空脫氣機(jī)進(jìn)行在線脫氣。

梯度洗脫時(shí)從流動(dòng)相比例從0%開始

現(xiàn)在的液相色譜能夠非常高效的進(jìn)行在線脫氣和流動(dòng)相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始，會(huì)有比較大的出現(xiàn)氣泡和沉淀的風(fēng)險(xiǎn)。