摘要：本實驗室已建立1例源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細胞系, 在此基礎(chǔ)上, 本研究擬對其蛋白表達特征、染色體核型和致瘤性進行探討, 旨在為進一步確定胰腺導(dǎo)管干細胞的生物學(xué)特性提供依據(jù)。
該文研究1例源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細胞系的蛋白表達特征、染色體核型及致瘤性。RPMI-1640有血清擴增培養(yǎng)源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細胞至單層, 分別采用流式細胞術(shù)或免疫熒光反應(yīng)檢測干細胞蛋白水平的表達特征。常規(guī)法制備染色體標本, 采用Adobe Photoshop CS6軟件進行核型分析。將干細胞移植在裸鼠體內(nèi), 觀察其致瘤性。
結(jié)果顯示, 該源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細胞在蛋白水平表達CK19、NeuroD2、Oct4、 PCNA及Nanog, 不表達Pdx1、Pax4、Pax6、MafA、Ptf1a、Ngn3、nestin、Sox2、CD34、CD45、 insulin、glucagon、ghrelin、somatostatin及secretin。細胞是正常的二倍體細胞(2n=42), 無致瘤性。這表明, 該源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細胞系共表達CK19、NeuroD2、Oct4、 PCNA及Nanog蛋白。
近年來, 研究者已分離培養(yǎng)源于人、小鼠、大鼠等的胰腺導(dǎo)管干細胞, 并對其蛋白表達等生物學(xué)特性進行了探討。例如, 有報道源于人胎兒的胰腺導(dǎo)管干細胞表達細胞角蛋白19(cytokeratin 19, CK19)、胰十二指腸同源盒1(pancreatic and duodenal homeobox 1, Pdx1)、 胰 高 血 糖 素(glucagon)和 神 經(jīng)上皮干細胞蛋白(nestin); 源于小鼠的胰腺導(dǎo)管末端/泡心干細胞表達胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子1a(pancreas specific transcription factor 1a, Ptf1a)、性別決定相關(guān)同源盒9(sry related HMG box 9, Sox9)、nestin、干細胞抗原1(stem cell antigen 1, Sca1)、基質(zhì)細胞源性因子-1(stromal cell derived factor-1, Sdf1)及肝細胞生長因子受體(c-hepatocyte growth factor receptor, c-Met)。但是, 目前有關(guān)胰腺導(dǎo)管干細胞表達特征的報道各異, 胰腺導(dǎo)管干細胞的特異性蛋白標志物還不確定。