LC-310檢測水產品中的孔雀石綠和結晶紫殘留量

2016年1月29日,北京市食品藥品監督管理局發布了《2015年執行食品藥品監管總局食品安全監督抽檢情況的公告(第6期)》，該公告涉及多家超市銷售的鮮活魚檢出了違禁物質孔雀石綠。
     孔雀石綠（Malachite Green），又名堿性綠、孔雀綠，化學名稱為四甲基代二氨基三苯甲烷，商品孔雀石綠以孔雀石綠草酸鹽、孔雀石綠鹽酸鹽或孔雀石綠氯化物的形式存在，是一種帶有金屬光澤的綠色結晶體，常用為殺真菌劑或者染料。長期以來，漁民在運輸過程中和存放池內，也常使用孔雀石綠，以預防魚類的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等，同時可以延長鱗受損的魚的生命。科研結果表明，孔雀石綠在魚體內殘留時間很長，且具有高毒性、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用。有鑒于此，許多將孔雀石綠列為水產養殖禁用藥物。2002年5月，我國也將孔雀石綠列入《動物食品禁用的獸藥及其化合物清單》中。但是，因其廉價，且治病功效是其他藥物“不能替代”的，故利益的驅動使得孔雀石綠并沒有完全退出漁業市場。
     結晶紫，是甲基紫（Methyl Violet）的俗稱，又名龍膽紫，是一類三苯基甲烷類工業染料和消毒防腐藥，有較好的殺菌作用，具有、廉價、易得等優點，作為化學消毒劑被廣泛應用于水產養殖疾病防治中。結晶紫具有高毒性、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用，各國也已禁止其在水產養殖業中使用。
     天瑞儀器一直致力于為客戶提供更完善的解決方案，LC-310液相色譜儀可同時用于水產品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的檢測。
1.儀器簡介
LC-310液相色譜儀是天瑞儀器多年液相色譜研發經驗的結晶，具有較高的靈敏度、分離度和可靠性。

圖1. LC-310液相色譜儀外觀圖

2. 實驗部分
2.1檢測原理
將樣品中殘留的孔雀石綠和結晶紫用硼氫化鉀還原為其相應的代謝產物隱性孔雀石綠和隱性結晶紫，用乙腈-乙酸銨緩沖溶液混合提取，二氯甲烷液液萃取，固相萃取柱凈化，反相色譜柱分離，液相色譜-熒光檢測器檢測，以保留時間定性，外標法定量。
2.2主要儀器、耗材和試劑
LC-310液相色譜儀（配套熒光檢測器）：江蘇天瑞儀器股份有限公司；
分析天平：精度十萬分之一（BT 125D，賽多利斯科學儀器（北京）有限公司）
超聲波清洗器（SK40Y，張家港市神科超聲電子有限公司）；
超純水機（Milli-Q Advantage A10，美國默克密理博公司產品）；
旋轉蒸發儀（RE-3000A，上海亞榮生化儀器廠）；
數顯高速分散均質機(FJ300-S，上海索映儀器設備有限公司)
固相萃取裝置（Supelco12，北京恒奧德儀器儀表有限公司）；
固相萃取柱（Cleanert PRS，500mg/3ml，博納艾杰爾科技）；
漩渦振蕩器等（QL-866，海門市其林貝爾儀器制造有限公司）。
2.3儀器測試條件
色譜柱：TR C18-X，4.6mm*250mm，5μm（江蘇天瑞儀器股份有限公司）；
流動相：乙腈+乙酸銨緩沖液（0.125mol/l，PH4.5）=80+20
柱流量： 1.3ml/min；
柱溫： 35℃；
進樣量：20μl；
檢測器：熒光檢測器
激發波長：265nm，發射波長：360nm；

圖2.孔雀石綠和結晶紫標準溶液色譜圖

三、小結
      LC-310液相色譜儀測定水產品中孔雀石綠和結晶紫的殘留量，靈敏度高，樣品干擾小，本方法條件下的孔雀石綠和結晶紫的方法檢出限均不超過0.5μg/kg，完全滿足國標及水產行業的管控要求。