上海時代生物科技有限公司在廣大科研用戶的幫助和支持下，經過多年不懈的努力，已成為國內生命科學試劑的國際運營商之一，代理許多國際先進水平的高科技產品，包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷，儀器儀表等多個研究及應用領域。

在飛速發展的今天，科研已成為一個時代進步的標志。在人們致力于科研的同時，我們也致力為行業鍛造一個更好的技術服務體系和更全面渠道支撐體系，而這恰恰是我們行業健康發展的重要條件和未來的目標。我們一直關注著生物行業的發展，致力于為客戶提供高質量的產品和優質的服務，上海時代生物科技有限公司立足上海，面向全國，真誠希望與每一位顧客建立良好的合作關系。

我們的服務理念："一切以誠信為本，一切以用戶價值為依歸！為顧客提供售前、售中、售后的全方位服務，不求最好，只為更好。"

 

公司致力于為廣大科研用戶提供Elisa產品應用方案，努力追蹤世界前沿的生物科技,為客戶提供更完善的產品線,歡迎來電咨詢!  

本說明書僅供參考，以公司現時提供為準，敬請來電索取。本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷。

大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)定量檢測試劑盒(ELISA)

使用說明書

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒試劑盒名稱】

大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)定量檢測試劑盒(ELISA)

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒試劑盒用途】

定量檢測血清、血漿及相關液體。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒檢測原理】

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)單克隆抗體透明酶標包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分，再加入酶標工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)濃度呈正相關，450nm波長下測定OD值，根據標準品和樣品的OD值，計算樣本中大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)含量。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒試劑盒組成】

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材】

1、37℃恒溫箱

2、標準規格酶標儀

3、精密移液器及一次性吸頭

4、蒸餾水

5、一次性試管

6、吸水紙

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒操作步驟】

1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。

2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍)；空白對照孔不加。

4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。

6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。

7、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

8、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。

9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s)，37℃避光顯色15min。

10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。

11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

12、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒樣本要求】

1、樣本不能含疊氮鈉(NaN₃)，因為疊氮鈉(NaN₃)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。

2、標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

3、樣本應充分離心，不得有溶血及顆粒。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒注意事項】

1、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

2、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。

4、牢記樣本已經稀釋5倍，計算結果乘以5才是樣本實際濃度。

5、本試劑盒定量范圍為6.25-200ng/L，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得，不做為準確定量結果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(6.25-200ng/L范圍內)，乘以總稀釋倍數即為樣本終濃度。

6、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間。

7、為避免交叉污染，標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復使用封板膜。

8、試劑盒保質期內使用，不同批號的試劑不得混用。

9、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒操作程序總結】

準備試劑，樣品和標準品

加入準備好的樣品和標準品，37℃反應30分鐘

洗板4次，加入酶標試劑，37℃反應30分鐘

洗板4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘

加入終止液

15分鐘之內讀OD值

計算

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒檢測范圍】

請來電咨詢

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規格】

96人份/盒 48人份/盒

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒貯藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒有效期】

6個月